硅膠色譜柱再生的方法是什么？

更新時(shí)間：2021-11-16 點(diǎn)擊次數(shù)：1656

　　1.硅膠色譜柱的平衡

　 硅膠色譜柱由工廠測試后是保存在水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇沖洗硅膠色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來平衡硅膠色譜柱，您就會(huì)在處理問題方面獲得的"補(bǔ)償"，而且您的硅膠色譜柱的壽命也會(huì)變得更長!操作步驟：

　　a.平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高，用流動(dòng)相平衡硅膠色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低，則需要較長的時(shí)間來平衡）

　　b.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。

　　2.硅膠色譜柱的再生

　　長期使用的硅膠色譜柱，往往柱效會(huì)下降（柱子的理論塔板數(shù)減低）?？梢詫枘z色譜柱進(jìn)行再生，在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。

　　建議用來沖洗柱子的溶劑體積

　　硅膠色譜柱尺寸柱體積所用溶劑的體積

　　125-4mm1.6ml30ml

　　250-4mm3.2ml60ml

　　250-10mm20ml400ml

　　選擇再生方法：

　　極性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色譜填料）的再生：

　　正庚烷→→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**

　　非極性固定相（如反相色譜填料RP-18，RP-8，CN等）的再生：水→乙腈→（或異丙醇）→乙腈→水

　　注意：

　　a.在對NH2改性的硅膠色譜柱進(jìn)行再生時(shí)，由于NH2可能以銨根離子的形式存在，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液*流出稀硫酸可以用來清洗已污染的硅膠色譜柱，如果簡單的用有機(jī)溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，在水洗后加用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。

　　3.硅膠色譜柱的維護(hù)

　　a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度）

　　b.大多數(shù)反相硅膠色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5，盡量不超過該硅膠色譜柱的pH范圍

　　c.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化

　　d.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理

　　e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈，并保存于甲醇或乙腈中

　　f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑，以避免腐蝕