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相信很多開發(fā)HPLC方法的實驗研發(fā)人員都開發(fā)出了無法分離混合物重要成分的方法,其方法可以是調(diào)整流動相、固定相或柱溫,另一種有效的方法是改變色譜柱粒徑。粒徑較小的液相色譜柱產(chǎn)生較高的塔板數(shù)以獲得更尖銳的峰,并且能夠分離緊密洗脫的峰。一些高分子量化合物在小孔徑填料上可能無法分離,但在用大孔徑填料填充的色譜柱上很容易分離。通常解決緊密或共洗脫峰的有效的方法是改變流動相組成或柱填料顆粒的鍵合相功能。分辨率方程清楚地確定了影響峰分辨率的三個主要因素:其中Rs是兩個靠近洗脫峰的分辨率(間...
選擇保護(hù)柱的原則是:在滿足分離分析要求的前提條件下,盡可能的選擇較短的保護(hù)柱,盡可能選擇對分離樣品保留弱的填料。大多數(shù)色譜工作者是根據(jù)分析柱的填料來選擇保護(hù)柱的填料,正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料。但是,根據(jù)實際的分析工作,可不必與分析色譜柱的填料全然匹配。色譜柱通常在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮樣品是否清潔,對于大部分分析工作來說,一支25px長的保護(hù)柱便能夠提供充分的保護(hù)作用。但是,如果樣品較臟,或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換25px的保護(hù)柱,那么就應(yīng)該選用50px或75p...
柱色譜法是一種常用于分離復(fù)雜混合物中分子的方法。與平面色譜不同,在柱色譜中固定相或樹脂被填充到色譜柱中。然后流動相通過填充的固定相以實現(xiàn)分離。這種分離的目的可以是分析性的或制備性的。柱層析在玻璃、塑料或金屬柱內(nèi)的填充三維固定相上進(jìn)行,可用于制備和分析目的。柱層析技術(shù)包含基于不同固相和液相化學(xué)和柱配置的廣泛應(yīng)用,能夠?qū)崿F(xiàn)精確分析以及分離難以或不可能通過其他方法分離的復(fù)雜混合物。有許多系統(tǒng)可用于液相色譜,系統(tǒng)的選擇取決于所需分離的復(fù)雜性。流動相可以通過重力流、使用離心力或使用基于...
舉個例子問您一個問題,您有沒有試過在濾紙條上放一小點黑色墨水,然后浸在溶劑溶液中的測試?您沒看到墨水是如何開始在紙條上移動并溶解成不同顏色的嗎?其實您完成了這個小實驗,您就已經(jīng)記住了什么是色譜。如果您從事化學(xué)工作或研發(fā)類實驗分析等相關(guān)領(lǐng)域,您可能遇到過液相色譜。液相色譜法是一種分析技術(shù),可將液體或混合物樣品分離成單獨的純組分。液相色譜技術(shù)是準(zhǔn)確的,并且由于樣品通過設(shè)備暴露于一組物理或化學(xué)反應(yīng)而發(fā)生,樣品經(jīng)過流動相和固定相以達(dá)到最終結(jié)果一、液相色譜過程涉及哪些步驟,是如何完成的...
液相色譜保護(hù)柱的性能關(guān)系很多因素,基質(zhì)或者說擔(dān)體、載體的化學(xué)性質(zhì)、鍵合相(固定液)的化學(xué)性質(zhì)、填料形狀大小粒度分布、碳量和鍵合度等。色譜柱填料可以由基質(zhì)直接構(gòu)成,如硅膠、氧化鋁、高交聯(lián)度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等;也可以在這些基質(zhì)的基礎(chǔ)上涂布或化學(xué)鍵合固定液來構(gòu)成,如:經(jīng)典的各種ODS柱、氨基柱、氰基柱等。主要基質(zhì)的特點:a.硅膠硅膠是陶瓷性質(zhì)的無機(jī)物基質(zhì),剛性大,不易變形?;瘜W(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定,但對于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的,即使表面經(jīng)過良好的化學(xué)鍵合,覆蓋了...
快看過來!你知道產(chǎn)生鬼峰的原因都有哪近年來隨著高效液相色譜儀的檢測器靈敏度和色譜柱峰容量的提高,可以在極低濃度下進(jìn)行檢測,但鬼峰問題卻成為了人們關(guān)注的焦點。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產(chǎn)生原因和解決措施吧!一、什么是鬼峰:如果化合物出現(xiàn)的時間少于預(yù)期的保留時間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預(yù)期保留時間的間隔內(nèi)出現(xiàn)的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會導(dǎo)致分離度降低,使評估...