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制備柱具有各種尺寸，可以實(shí)現(xiàn)高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中，達(dá)到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應(yīng)用在植物化學(xué)、藥物合成、生物化學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品的提取及純化工作中。不同的工作領(lǐng)域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術(shù)領(lǐng)域中，酶的分離是μg級(jí)；在天然產(chǎn)物化學(xué)和合成化學(xué)領(lǐng)域中，為應(yīng)對(duì)未知成分定性鑒別、結(jié)構(gòu)測(cè)定、生物活性測(cè)試等要求，需要純化若干mg級(jí)的高純物；在藥品和醫(yī)藥學(xué)測(cè)試中，需要g級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品；在工業(yè)級(jí)提純中，目標(biāo)產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)往往需要kg級(jí)...

1.高壓勻漿法裝填液相色譜柱將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿，在其尚未沉降之前，很快以高壓泵將其以很高的流速壓進(jìn)柱中，便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。2.濕法裝填對(duì)于柱、特別是現(xiàn)在流行的以3-10μm細(xì)柱徑填料填裝的分析柱，則必須使用濕法，即勻漿法裝柱。因?yàn)椋S著粒徑的縮小，因靜電作用和表面能的加大，粒子間傾向于聚集和“粘結(jié)”，若以干法填裝，它們會(huì)粘附在連接管及柱壁上，也會(huì)因強(qiáng)烈的靜電作用彼此排斥，因而難以填裝出均勻而緊密的柱床。這樣，必須改...

C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長(zhǎng)度的不同，內(nèi)徑的差異等多方面因素，呈現(xiàn)出不同選擇性。柱填料的選擇關(guān)系到色譜分離的可能性，而柱規(guī)格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測(cè)能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規(guī)格包括兩方面：柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng)度。柱內(nèi)徑，分析型一般為2～6mm,制備型20mm，大者可達(dá)80mm；柱長(zhǎng)度，分析型5～30cm，制備型15～50cm。一般來(lái)說(shuō)，柱內(nèi)徑不影響分離度與分析時(shí)間的關(guān)系。今天，柱技術(shù)已發(fā)展到不同柱內(nèi)徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內(nèi)徑的柱子又各具特...

日常分離分析工作中，c18液相色譜柱的使用和維護(hù)十分重要，液相色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時(shí)，動(dòng)作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng)，以免柱床產(chǎn)生空隙。（2）如果儀器用來(lái)做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長(zhǎng)柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的...

1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長(zhǎng)的特點(diǎn)，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長(zhǎng)的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對(duì)分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動(dòng)相水相過(guò)大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過(guò)烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用ZorbaxStableBondC18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。5)低端...

影響C18色譜柱壽命的幾個(gè)因素主要包含：流動(dòng)相因素，樣品因素與其他因素。色譜柱使用過(guò)程中應(yīng)該注意這些因素，才能有效增加使用壽命。一、流動(dòng)相因素1、流動(dòng)相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無(wú)定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg/L-1，且在pH1～9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量，考慮到溶解速度的影響，對(duì)于硅膠基質(zhì)的填料，其所能承受的流動(dòng)相pH范圍約為1～8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用，使填料對(duì)流動(dòng)相的適應(yīng)范圍大大增加，如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C1...